無(wú)菌控制專(zhuān)題（六）|以CAR-T/干細(xì)胞為例探討過(guò)程無(wú)菌

細(xì)胞制備過(guò)程中，無(wú)菌控制是確保最終產(chǎn)品質(zhì)量和安全性的關(guān)鍵。無(wú)論是CAR-T細(xì)胞還是干細(xì)胞，其制備都涉及多個(gè)環(huán)節(jié)，包括樣本采集、細(xì)胞分離、基因轉(zhuǎn)導(dǎo)/轉(zhuǎn)染、擴(kuò)增、收獲、制劑制備及放行檢驗(yàn)等。這些步驟中的每一步都需要在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止微生物污染。

無(wú)菌控制策略的核心在于阻止無(wú)菌的、未被污染的物質(zhì)或物品與任何有菌的、被污染的物體相接觸。理想情況下，所有無(wú)菌操作都應(yīng)在層流式超凈臺(tái)中進(jìn)行，且操作者需嚴(yán)格遵守個(gè)人衛(wèi)生規(guī)范，包括穿戴潔凈的實(shí)驗(yàn)服、乳膠手套，并使用70%乙醇或其他適當(dāng)?shù)南緞┻M(jìn)行手部消毒。

封閉化制備流程是細(xì)胞制備過(guò)程中無(wú)菌控制的重要手段之一。封閉化制備流程通過(guò)減少操作人員與細(xì)胞的直接接觸，降低生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。這種流程通常使用自動(dòng)化設(shè)備，如全自動(dòng)免疫細(xì)胞培養(yǎng)工作站，該設(shè)備搭載一次性管路系統(tǒng)，在出廠時(shí)即進(jìn)行預(yù)滅菌處理，且一套管路系統(tǒng)對(duì)應(yīng)一份樣本，一次性使用，用完即棄。

以CAR-T細(xì)胞制備為例，其制備過(guò)程包括細(xì)胞分離、基因轉(zhuǎn)導(dǎo)、擴(kuò)增等關(guān)鍵步驟。這些步驟在封閉化系統(tǒng)中進(jìn)行，不僅減少了污染的風(fēng)險(xiǎn)，還提高了制備的效率和可靠性。此外，封閉化系統(tǒng)還能實(shí)現(xiàn)全流程記錄，包括操作時(shí)間、操作步驟、補(bǔ)液量等，確保每一步操作都可追溯，從而提高了產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。

一次性管路系統(tǒng)是封閉化制備流程的重要組成部分。該系統(tǒng)采用預(yù)滅菌的一次性材料，避免了重復(fù)使用可能帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn)。在CAR-T制備過(guò)程中，一次性管路系統(tǒng)能夠確保細(xì)胞在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行分離、轉(zhuǎn)導(dǎo)、擴(kuò)增等操作，從而保證了產(chǎn)品的無(wú)菌性。

此外，一次性管路系統(tǒng)還簡(jiǎn)化了清潔和驗(yàn)證過(guò)程，降低了生產(chǎn)成本和時(shí)間。由于每套管路系統(tǒng)都是一次性的，因此無(wú)需進(jìn)行繁瑣的清潔和驗(yàn)證工作，從而提高了生產(chǎn)效率。

封閉化運(yùn)行的自動(dòng)化培養(yǎng)設(shè)備是細(xì)胞制備過(guò)程中無(wú)菌控制的另一大利器。友康全自動(dòng)免疫細(xì)胞培養(yǎng)工作站培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，在A級(jí)生物安全柜環(huán)境對(duì)接完成后，經(jīng)B級(jí)環(huán)境轉(zhuǎn)移進(jìn)自動(dòng)化封閉系統(tǒng)中進(jìn)行細(xì)胞生產(chǎn)，設(shè)備及配套管路系統(tǒng)在運(yùn)行時(shí)完全封閉，且能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)和控制培養(yǎng)環(huán)境參數(shù)，如溫度、濕度、二氧化碳濃度等，完全符合GMP管理規(guī)范。

該設(shè)備通過(guò)模塊化設(shè)計(jì)，能夠靈活適應(yīng)不同種類(lèi)的細(xì)胞培養(yǎng)需求，包括CAR-T、TCR-T、TIL、NK等。同時(shí)，該系統(tǒng)還能夠?qū)崿F(xiàn)全流程記錄，包括細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)、環(huán)境參數(shù)等，確保每一步操作都可追溯。此外，設(shè)備還配備了故障警報(bào)系統(tǒng)，確保生產(chǎn)過(guò)程中的安全性和可靠性。