產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品使用兩種熒光探針，F(xiàn)AM和HEX，分別檢測(cè)支原體目標(biāo)序列和內(nèi)參對(duì)照。FAM通道特異性檢測(cè)支原體，HEX通道檢測(cè)內(nèi)參對(duì)照。內(nèi)參對(duì)照可在PCR反應(yīng)階段加入，用于排除因樣品中含有PCR抑制因素導(dǎo)致的假陰性結(jié)果；也可在樣品提取階段加入，用于評(píng)估提取效果，排除提取不當(dāng)而導(dǎo)致的假陰性。
本產(chǎn)品能夠與本公司的兩款核酸提取試劑盒搭配使用，提取樣品中的支原體DNA，排除不同樣本基質(zhì)的干擾，提高檢測(cè)的靈敏度。
產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品貨號(hào)：MY0001-50
產(chǎn)品規(guī)格：50T/盒
試劑盒組成
| 試劑名稱 | 規(guī)格（50T) | 主要成分 |
5×反應(yīng)液 | 250μL/管×1管 | 反應(yīng)緩沖液、引物、探針、dNTPs |
酶 | 12.5μL/管×1管 | Taq DNA聚合酶 |
陽(yáng)性對(duì)照 | 200μL/管×1管 | 豬鼻支原體質(zhì)粒模板 |
內(nèi)參對(duì)照 | 500μL/管×1管 | 內(nèi)參質(zhì)粒模板 |
水 | 1000μL/管×1管 | DEPC處理水 |
檢測(cè)結(jié)果
本試劑盒設(shè)置陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照作為質(zhì)控，跟蹤待測(cè)樣本的檢測(cè)，擴(kuò)增曲線示例見圖1。
圖1陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增結(jié)果示例
產(chǎn)品性能
1. 檢測(cè)限
使用中國(guó)藥典、EP2.6.7、USP<63>、JP G3等規(guī)定的支原體物種作為模板測(cè)定，這些支原體有不同的來(lái)源，存在不同模板單位上的驗(yàn)證結(jié)果。
物種 | 檢測(cè)限 |
口腔支原體（Mycoplasma orale） | ≤10CFU/ml |
豬鼻支原體（Mycoplasma hyorhinis） | ≤5GC/反應(yīng) |
肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae） | ≤1.21fg/反 |
萊氏無(wú)膽甾原體（Acholeplasma laidlawi） | ≤0.5fg/反應(yīng) |
發(fā)酵支原體（Mycoplasma fermentans） | ≤5fg/反應(yīng) |
精氨酸支原體（Mycoplasma arginini） | ≤5fg/反應(yīng) |
唾液支原體（Mycoplasma salivarium) | ≤0.5fg/反應(yīng) |
2. 特異性
該qPCR試劑盒也可檢測(cè)更多的柔膜體物種（見下表），但不會(huì)檢測(cè)到進(jìn)化樹上相關(guān)的其他物種，如梭菌、乳桿菌和鏈球菌，和其他細(xì)菌和細(xì)胞DNA均無(wú)交叉反應(yīng)。
能檢測(cè)到的其他柔膜體 | 經(jīng)檢測(cè)，不會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的物種 | ||
歐洲藥典列舉的細(xì)菌 | 其他細(xì)菌 | 細(xì)胞 | |
生殖支原體 | 丙酮丁醇梭菌 | 金黃色葡萄球菌 | 293細(xì)胞DNA |
人型支原體 | 嗜酸乳桿菌 | 銅綠假單胞菌 | NK細(xì)胞DNA |
解脲脲原體 | 肺炎鏈球菌 | 枯草芽孢桿菌 | 干細(xì)胞DNA |
微小脲原體 | 大腸桿菌 | ||
白色念珠菌 | |||
黑曲霉 | |||
參照EP2.6.7的NAT驗(yàn)證指南相關(guān)的驗(yàn)證，還在進(jìn)一步完善中。
