如何進(jìn)行核酸檢測(cè)？

核酸檢測(cè)包括一系列分子生物學(xué)的方法，例如聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction,PCR），核酸雜交，基因測(cè)序等，應(yīng)用于傳染病監(jiān)測(cè)，腫瘤、生殖醫(yī)學(xué)，農(nóng)業(yè)等各個(gè)領(lǐng)域。根據(jù)檢測(cè)目的的不同，選擇不同的檢測(cè)方法。我們目前常說(shuō)的核酸檢測(cè)主要是指聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），也是目前確定是否感染新冠病毒的最主要手段。

PCR技術(shù)以選定的特異性核酸區(qū)域?yàn)榘袠?biāo)，基于核酸的復(fù)制原理和規(guī)律，每一輪擴(kuò)增都會(huì)使目標(biāo)核酸片段成倍遞增，直到可以被特定的儀器檢出。通過數(shù)輪擴(kuò)增，目標(biāo)核酸片段可達(dá)到起始量的數(shù)百萬(wàn)倍。

在傳統(tǒng)PCR技術(shù)的基礎(chǔ)上，又發(fā)展出了實(shí)時(shí)熒光PCR。實(shí)時(shí)熒光PCR是在擴(kuò)增體系中引入了能與目標(biāo)核酸片段結(jié)合的特異性熒光標(biāo)記探針，從而達(dá)到實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)的目的。每一輪擴(kuò)增都會(huì)累計(jì)熒光信號(hào)，擴(kuò)增出的目標(biāo)序列越多，累積的熒光信號(hào)就越強(qiáng)，當(dāng)累計(jì)的熒光信號(hào)高于設(shè)定的閾值時(shí)，可認(rèn)為是陽(yáng)性信號(hào)，熒光信號(hào)達(dá)到閾值所需要的PCR循環(huán)次數(shù)即為Ct（threshold cycle,Ct）。目標(biāo)核酸片段起始量越高，熒光信號(hào)達(dá)到閾值所需要的循環(huán)數(shù)越少，Ct值越小。當(dāng)熒光信號(hào)在一定循環(huán)次數(shù)內(nèi)可以達(dá)到閾值時(shí)，即Ct小于一定數(shù)值時(shí)，目標(biāo)核酸檢測(cè)為陽(yáng)性。