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什么是核酸純化?

2023-06-26

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核酸純化的目的是以最佳方式將DNA和/或RNA從所有其他細(xì)胞和細(xì)胞外成分中分離出來(lái)并進(jìn)行純化。純化可以去除所有(細(xì)胞外)成分和其他干擾物質(zhì)。一般來(lái)說(shuō),基質(zhì)成分會(huì)產(chǎn)生負(fù)面影響(吸附、抑制和水解),而生化試劑會(huì)刺激或抑制測(cè)定,如PCR,取決于其濃度。創(chuàng)造一個(gè)可以提純DNA和/或RNA的水環(huán)境是非常重要的。一旦細(xì)胞的完整性被打破,許多可能干擾PCR結(jié)果的因素就會(huì)釋放到溶液中。盡管粗制的分離物可以作為PCR的樣本,但大多采用純化步驟。這尤其涉及到容易迅速分解的mRNA。

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現(xiàn)在常規(guī)分子診斷中使用的大多數(shù)程序都是基于核酸和硅酸鹽的親和力結(jié)合,同時(shí)洗掉所有其他成分。通過(guò)這種方式,可以得到幾乎只含有核酸的純化洗脫液。以前,核酸研究的金標(biāo)準(zhǔn)是苯酚-氯仿-異戊醇萃取。這種方法在很大程度上已經(jīng)被新的方法所取代,這些方法花費(fèi)的時(shí)間更少,產(chǎn)生的有毒廢品更少,而且應(yīng)該對(duì)許多常規(guī)應(yīng)用足夠有效。


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